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本制品适用于动物原生代或培养细胞的钙沉积和钙化结节快速检测。广泛用于骨细胞或组织病理生理的研究。


茜素红S是一种蒽醌衍生物：9,10-二氢-3,4-二羟基-9,10-二氧代-2-蒽磺酸单钠盐，又称媒介红3(Mordant Red 3)或茜素磺酸钠。其分子式为C14H7NaO7S，分子量为342.25。茜素红和钙离子以鳌和方式形成复合物，用以识别组织细胞的钙盐成分。钙盐变化是骨细胞增殖分化和骨组织成骨潜能的标志之一。通过茜红素染色，产生桔红色沉积，但会受到其它金属元素的干扰。

组分	规格
茜素红染色液(pH4.2)	10mL
说明书	1份

保存：2～8℃，避光，有效期1年。


以6孔板为例，每孔孵育的染色工作液为500μL，本试剂盒可以做20个样本；以普通切片和96孔细胞为例，每张玻片孵育的染色工作液为100μL，本试剂盒可以做100个样本。


显微镜、载玻片、盖玻片、无水酒精、二甲苯、中性树胶、亮绿复染液、70%乙醇固定液(不含钙)。

1. 6孔板培养细胞爬片：
   去除培养基，1×PBS(pH7.2，不含钙镁)洗涤细胞爬片2次，70%乙醇室温固定细胞60min，去除固定液，1×PBS(pH7.2，不含钙镁)洗涤细胞爬片2次后待用。
   注意：本步骤的固定液也可用4%多聚甲醛来替代，室温15～30min。
   
2. 冰冻切片：
   冰冻切片，室温平衡，1×PBS(pH7.2，不含钙镁)洗涤2次，待用。100%甲醇固定1～2分钟。
   
3. 石蜡切片：
   
   1. 脱蜡：二甲苯中脱蜡5～10分钟。再换用新鲜的二甲苯，脱蜡5～10分钟。
      
   2. 梯度入水：95%、70%、30%乙醇各2分钟，蒸馏水2分钟。

1. 茜素红S染色
   
   1. 以茜素红染色液覆盖样本，室温避光孵育30分钟。(气温高，可适当缩短时间，反之，延长时间)
      
   2. 取出染色玻片，双蒸水缓慢冲洗玻片3～5分钟。
      注意：细胞爬片样本建议多用1×PBS，pH7.2，不含钙镁洗涤5次，每次2min，直接显微镜拍照观察。
2. 亮绿染色(组织样本可选步骤(组织样本可选步骤)
   滴加1～2滴亮绿染色液覆盖样本，染色20-30S。
   
3. 分化透明处理、分化透明处理(组织样本可选步骤(组织样本可选步骤)
   
   1. 盐酸-酒精分化液每片100μL覆盖样本10S后去除。
      
   2. 无水酒精脱水，二甲苯透明。
      
   3. 封片剂封片后，显微镜观察，拍照。

钙沉积阳性细胞呈现桔红色；
胞浆及胶原纤维呈现绿色(可选)。
相关搜索：茜素红染色液(pH4.2)，茜素红染色液